Método de sonda QPCR

Mar 01, 2022 Deixe um recado

Coronavírus é um tipo de vírus com envelope e genoma linear de RNA encalhado. Seu diâmetro é de cerca de 80-120nm. Atualmente, só infecta vertebrados como humanos, ratos, porcos, gatos, cães e aves. O novo Coronavirus COVID-19 foi identificado como uma nova variante, que pode causar pneumonia viral, febre leve, tosse seca, dificuldades respiratórias pesadas e até choque.

O novo kit de detecção nucleico de ácido nucleo (COVID-19) desenvolvido pela RXC desenvolveu um design de alvo duplo baseado no gene ORF 1ab (RDRP) do New Coronavirus e na sequência conservada específica codificando o gene N da proteína nucleocapsida. Usando uma reação em cadeia de transcriptagem reversa de uma passo (RT-PCR) combinada com a tecnologia da sonda de hidrólise TaqMan, a amostra RNA foi detectada pela alteração do sinal de fluorescência no instrumento PCR quantitativo de fluorescência.

O sistema de detecção do PCR inclui primers e sondas para genes padrão interno. O processo de coleta e extração de amostras é monitorado detectando se o padrão interno é normal para evitar resultados falsos negativos.

O novo kit de detecção nucleírica de ácido nucleírico (método PCR digital) desenvolvido pela rui Xun biology utilizou a tecnologia DE PCR digital gotlet combinada com a tecnologia de sonda de fluorescência Taqman para realizar a detecção qualitativa do Novo Coronavirus.

As amostras foram atribuídas aleatoriamente a dezenas de milhares de gotículas de óleo produzidas por chip PCR digital. A gota foi reagida com PCR. Após o término da reação do PCR, os sinais de fluorescência de cada gotícula foram lidos, e o princípio de distribuição de Poisson foi utilizado para estatísticas e análises, de modo a obter a detecção precisa de cópias genéticas específicas do Novo Coronavírus (COVID-19).

Entre eles, a sonda de detecção de 1ab COVID-19 ORF 1ab foi rotulada com fluorescência FAM, a sonda de detecção de genes N foi rotulada com fluorescência de hexax, e o padrão interno foi rotulado com fluorescência Cy5.


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